为大家推荐一种非常简单但高效,仅需三个步骤就能将hPSCs分化为成熟骨骼肌细胞的新方法——来自Myocea公司的Skeletal Muscle Differentiation Kit。该方法的优点是仅需要单层细胞培养就可以制备出大量的SkMCs,而*表达肌原性转录因子或细胞分选等额外操作。由于成肌祖细胞和成肌细胞具有很高的增殖能力,可以通过常规传代方式进行大规模扩增,从而获得大量分化的肌管细胞。因此,该方法非常简单高效,并且适用于自动化和大规模生产。实验表明,仅用6×104个hPSCs就可以生产出7.5×107个SkMCs,说明了该方法具有很高的效率和可扩展性。 Myocea的Skeletal Muscle Differentiation Kit是世界**能将hPSCs分化为骨骼肌细胞的商品化培养基系统,由四个培养基组成。通常情况下,从人多能干细胞生成肌细胞需要3个阶段(如上图),即依次生成卫星样祖细胞(satelite-like progenitor cells)和成肌细胞(myoblasts),最后融合成为多核肌管细胞(multinucleated myotubes)。因此Skeletal Muscle Differentiation Kit包含了三个分化阶段所需的三种培养基,此外它还提供了一个促进肌管融合的培养基作为可选组分,可根据研究者希望得到的细胞表型灵活选择。骨骼肌分化系统的四个培养基详情见下表。 品牌 货号 品名 Myocea SKM01-250mL Skeletal Muscle Induction Medium (Stage I) Myocea SKM02-250mL Skeletal Myoblast Medium (Stage II) Myocea SKM03-250mL Myotube Medium (Stage III, Option 1) Myocea SKM03+-250mL Myotube Fusion Medium (Stage III, Option 2) 用该培养系统分化生成的肌细胞通常由70-90%的肌管细胞和10-25%的肌前体细胞组成。如下图细胞标志物染色显示肌细胞表型成熟且功能完整。 更重要的一点是,通过标志物的核酸与蛋白表达水平的比对发现,该方法具有很高的可重复性,几株不同的干细胞系分化实验比对显示组间差异很小,稳定性非常好。因此,Skeletal Muscle Differentiation Kit还适用于高通量筛选和药物开发。 综上所述,Skeletal Muscle Differentiation Kit包括了以下优势特点,确实是一个令人心动的骨骼肌分化方案。 肌细胞生成率高。 三步法操作简单,*细胞分选,*表达肌原性转录因子。 实现了成肌细胞的扩增和储存,从而建立可再生的肌细胞库。 方法稳定,重复性好。 Myocea, Inc.是一家专注于提供神经肌肉疾病领域产品与服务的公司,是能够为相关制药企业试剂与合同服务的学术型战略合作者。Myocea公司是目前世界上拥有较大的人类胚胎干细胞的细胞库之一,并已开发和推出了世界**稳定、高效且可扩展的专业骨骼肌细胞分化培养基系统。 北京西美杰科技有限公司是Myocea品牌的中国区总代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。